電泳儀、電泳槽的使用方法 電泳儀：電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究*的重要分析手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類。自由界面電泳不需要支持，例如等電聚焦電泳、等速電泳、密度梯度電泳和微電泳。這些類型的電泳目前很少使用。 .對于區(qū)域電泳，各種類型的物質(zhì)被用作支持物。常用的載體有濾紙、醋酸纖維素薄膜、非凝膠載體、凝膠載體和硅膠-G薄層。分子生物學(xué)領(lǐng)域z常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳，是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動。不同的物質(zhì)由于其不同的電荷和分子量而在電場中以不同的速度運(yùn)動。根據(jù)這一特點，電泳的應(yīng)用可用于不同物質(zhì)的定性或定量分析。 ，或?qū)δ撤N混合物或提取物進(jìn)行成分分析，制備單一成分，在臨床檢驗或?qū)嶒炑芯恐芯哂兄匾饬x。本電泳儀就是根據(jù)上述原理設(shè)計制造的。下面簡單介紹一下它的使用方法和注意事項。
● 使用方法
1、首先用導(dǎo)線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端連接起來，注意不要接反。
2. 將電泳儀電源開關(guān)調(diào)至關(guān)閉位置，將電壓旋鈕旋至最小。根據(jù)工作需要選擇電壓電流量程和電壓電流量程。
3、打開電源，慢慢旋轉(zhuǎn)電壓調(diào)節(jié)旋鈕，直到達(dá)到所需電壓，設(shè)置電泳終止時間，此時開始電泳。
4、工作完成后，應(yīng)將旋鈕和開關(guān)旋至零位或關(guān)閉，并拔出電泳插頭。
筆記
1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電極、電泳物體等可能帶電的部位，也禁止在電泳槽內(nèi)取放東西。如有必要，請先斷電，以免觸電。同時要求儀器必須有良好的接地端子，以防漏電。
2、儀器上電后，請勿臨時加裝或拔出輸出線插頭，以防短路。雖然儀器配備了保險絲，但短路仍可能對儀器造成損壞。
3.由于不同介質(zhì)支架的電阻值不同，電游泳時通過的電流量也不同，游泳速度和游到終點所需的時間也不同，所以不同介質(zhì)載體的電泳不宜同時在同一臺電泳儀上進(jìn)行.
4、總電流不超過儀表額定電流（最大電流范圍）時，可多槽聯(lián)用，但注意不要過載，否則容易影響儀表壽命。
5、在某些特殊情況下，需要檢查儀器的電泳輸入時，允許在穩(wěn)定電流狀態(tài)下空載開機(jī)，但在穩(wěn)定電流狀態(tài)下，必須接好負(fù)載后再開機(jī)，否則電壓表的指針會大幅度跳動，容易造成不必要的人為損壞。
6、在使用過程中如發(fā)現(xiàn)噪音大、放電或有異味等異常現(xiàn)象，必須立即切斷電源并進(jìn)行維修，以免發(fā)生意外。
夾層式立式電泳槽使用方法：
1. 組件
(1) 一對裝有鉑絲的儲液罐，裝有冷卻裝置和電泳緩沖液出口。
(2)凹膠框配玻璃板，可分別制作1mm、1.5mm厚的凝膠板。操作時要選擇厚度合適的玻璃板和梳子配合使用。
(3) 樣品孔模具（梳子）用于電泳上樣。
(4) 固定儲液罐的螺桿和螺母有4對，28D和30型有5對。
(5) 五個橡膠管。兩條長條用于連接冷卻水的進(jìn)出水口；兩個中等長度用于連接電極緩沖；介質(zhì)液體的流出端口；最短的一個用于連接儲液罐之間的冷卻水。
(6) 電線 1 對。
● 2. 如何使用
(1) 清洗部件
上述部件在組裝前應(yīng)*清潔。特別是玻璃板和凹槽橡膠框必須用海綿蘸少許肥皂粉或清潔劑*清潔。清洗后的玻璃板在使用前應(yīng)放在玻璃板架上晾干。
(2) 組裝電泳槽
A、 1. 將四個固定螺釘分別插入儲液架（半上罐）的相應(yīng)孔中，然后將儲液架放在桌面上。
2、左手握住凹槽橡膠模架，右手拇指和中指握住玻璃板的兩側(cè)邊插入橡膠模架（注意手指不能碰到上面的玻璃）充滿膠水的表面）盤子）。
3、將帶玻璃的橡膠模架放在倒置的儲液罐框架上，其下邊緣必須與儲液罐框架的下邊緣對齊。
4、雙手握住另一個儲液罐框架，與放在桌面上的儲液罐框架相匹配，在儲液罐有機(jī)玻璃框架中心的橡膠框架上做凸出線。
5. 安裝四個螺母并擰緊螺釘。注意擰緊螺絲時用力要均勻，最好用雙手在斜角處逐漸擰緊。
6、將電泳槽垂直立起，放在桌面上。玻璃板短的儲液槽稱為上槽（陰ji端），玻璃板長的儲液槽稱為下槽（陽極duan）。玻璃板與膠框之間有間隙。這個間隙可以沿著長玻璃板的下端填充融化的 10% 瓊脂。為防止氣泡滯留，可輕輕抬起一端將氣泡去除。在瓊脂*凝固之前不要倒入凝膠。
B、也可以垂直豎立凹槽，將帶玻璃的橡膠模架直接放入凹槽中，對稱擰緊螺絲，底部邊緣用瓊脂密封。
(3)灌膠
1、先灌分離膠，待凝固后再倒?jié)饪s膠。灌膠前先連接好冷卻水，并夾住連接上下儲液罐的兩根膠管。
2. 用細(xì)尖滴管吸膠，從一端沿著長短玻璃板的間隙滴加膠水。為了防止氣泡的產(chǎn)生，可以將另一端稍微挑起（氣泡往上），不斷加膠。如果用單層膠（分離膠），加膠量在距離短玻璃板上端0.3厘米左右，輕輕加少許水，雙手輕輕插入梳子，凹出小樣凝膠化后可形成注射孔。
3、為防止漏膠，應(yīng)立即在上下儲液槽中加入蒸餾水，但蒸餾水不得超過短玻璃板的上緣。
4、凝膠凝固后，可以看到樣品槽的梳子和凝膠板之間有一層不同折射率的亮區(qū)。
(4) 添加樣本
1、松開連接上下儲液罐的兩根橡膠管上的夾子，放出罐內(nèi)的蒸餾水，待水用完后再夾住夾子。
2、雙手輕輕取出加樣梳，可以看到加樣孔邊界清晰，吸干孔內(nèi)的水分（注意不要沿孔邊緣損壞字面）。
3、上下儲液罐加緩沖液；對于中間液體，液體高度應(yīng)超過上儲液罐短玻璃板的上沿。
4、用微測量注射器吸取一定量的樣品，加到長短玻璃板之間的凹形凝膠樣品孔中（注意加樣動作要輕，針頭不要損傷凝膠表面）。
(5) 電泳
第一儲液器的引線連接到電泳儀的負(fù)極，下儲液器的引線連接到電泳裝置的正極。檢查電路是否正確后，才能按要求的電壓和電流進(jìn)行電泳。
(6)取出塑料板
電泳完畢，擰下螺母，取出塑料框，撕下玻璃板，在兩塊玻璃板下角的縫隙中，用刀片背面輕輕撬動，然后將塑料面和一個分開玻璃板，將帶膠板的玻璃板放在桌面上，雙手沿凝膠底部輕輕提起薄膜，放入大培養(yǎng)皿中進(jìn)行染色。膠板經(jīng)過漂洗脫色后可以清晰看到膠條分開。 |
