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    技術文獻
     

    高速微量離心機與超速離心機的離心方法

    點擊次數(shù):616 更新時間:2021-09-23

    高速微量離心機與超速離心機的離心方法

            什么是高速微量離心機?
            高速微量離心機特別適用于高速微濾。一般轉速為16000r/min,容量較小。采用微型無刷直流電機,升降速度快,無灰塵,無灰塵。維持。電子門鎖安全可靠。微電腦控制,外形采用*化鋼結構,精致美觀,數(shù)字顯示,RCF離心力開關顯示,編程操作,使用方便。
            超速離心機的離心方法
            離心分離生物大分子和亞細胞物質的基本原理是它們在液體介質中根據(jù)不同的沉降速度,或不同的密度形成不同的區(qū)域,并在液體介質中的不同位置將它們一一分離。前者是沉降速度法。使用這種方法時,液體介質的最大密度小于樣品中最小顆粒的密度。離心速度快,時間短;后者是沉降平衡法,液體介質的最大密度為 大密度大于樣品中最小顆粒的密度,離心應采用較低的速度和較長的時間。實際操作有幾種形式:
            差速離心
            這種方法是選擇不同速度的離心來分離不同的成分。例如,大顆粒和上清液先低速沉降,中顆粒在高速離心后沉降在上清液中,小顆粒在超速離心后沉降在上清液中。通過逐步增加離心力來分離上層流體,從而分離出不同大小的顆粒。這種方法比較簡單方便。分離的組分沉入管底,因此您可以快速濃縮所需組分并減少體積。但是,回收率和純度之間存在矛盾。為了提高回收率,需要提高離心速度或延長離心時間,使大小相近的顆粒也沉到管底。因此,該方法多用于樣品的粗提純或初步濃縮。
            速度區(qū)(或速度梯度)離心
            在該方法中,樣品被放置在連續(xù)密度梯度液體上。通過離心,大顆粒快速沉降,小顆粒緩慢沉降。一段時間后,相同的粒子在相同的深度形成一條帶,從而將各種成分分開。適用于分離密度相同但尺寸不同的物質。例如,不同的蛋白質成分具有相似的密度但具有不同的分子量。這種方法很容易將它們分開。但是,要分離密度不同、大小相近的物質并不容易。蔗糖梯度是一種常用的培養(yǎng)基。使用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)形成梯度進行梯度分離心。然后分別收集不同區(qū)域的組件。
            沉降平衡離心
            這是一個靜態(tài)方法。在離心管中形成液體梯度。在離心過程中,每個組分以不同的速度下沉,但最終保持與自身相同的密度,形成一個狹窄的平衡區(qū)并保持相對穩(wěn)定。為了使樣品的所有成分達到其平衡位置,需要長時間離心。該方法適用于分離大小相近但密度不同的物質,如核酸的分離。氯化銫梯度是平衡離心中常用的介質。它具有高分辨率,可以區(qū)分密度差為0.05的成分。但是離心時間要十幾到幾十個小時,而且價格很貴。已經有一種名為“Percoll"的 Ficoll 溶液可以替代氯化銫梯度。介質可快速形成梯度,使離心時間大大縮短至1-2h,同時仍具有良好的分離效果。并且有匹配的標記珠(Densitymarkerbeads)來確定樣品的密度。

     
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